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微生物法測定維生素B12,要用優質培養基
由 論時尚 發表于 農業2021-06-08
簡介微生物法的原理是,根據試驗菌株對微生物B12的特異性和靈敏性,在含有除維生素B12以外所有營養的【測定培養基】中,加入標準曲線工作液以及未知待測樣品溶液,根據微生物生長產生的透光率,對待測樣本中微量的微生物B12進行測定
生物法主要用於什麼處理
維生素B12,是人體必需維生素,在維持機體正常造血和神經功能健全中起到至關重要的作用。因此,對於嬰幼兒配方乳品和營養補充食品中,測定維生素B12十分必要。
我國《GB 5413。14-2010食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定》規定了採用萊士曼氏乳酸桿菌(ATCC 7830)測定維生素B12的整個流程。實際亦有多篇報道,肯定了微生物法的準確可靠,並且測定樣品還包括腸內營養粉劑、多維元素片、維生素飲料以及含乳飲料等[1-4]。
微生物法的原理是,根據試驗菌株對微生物B12的特異性和靈敏性,在含有除維生素B12以外所有營養的【測定培養基】中,加入標準曲線工作液以及未知待測樣品溶液,根據微生物生長產生的透光率,對待測樣本中微量的微生物B12進行測定。
其中,測量的準確度尤其依賴於維生素B12在一定濃度範圍內與透光率呈現良好的線性關係。而是否呈良好的線性,又與所用的【測定培養基】有很大的關係。有機構採用了不同品牌的【維生素B12測定培養基】進行測定,發現兩個國產品牌培養基的接種空白依然有生長,勉強可獲得標準曲線,但線性結果不理解。而進口品牌的“標準曲線明顯梯度正生長, 獲得較理想的標準曲線, 線性結果較理想”[5]。
參考文獻
1。 蔣孟虹,許蘋,秦峰,劉浩,楊美成。 微生物法測定腸內營養粉劑中微量維生素B12的含量[J]。食品安全質量檢測學報,2016,7(3):893-897
2。 盧京光,裴琳,楊龍華。線上微生物濁度法測定多維元素片中微量維生素B12的含量[J]。藥物分析雜誌,2011,031(009):1837-1839
3。 陳亞波,周敏,楊彤。微生物法測定維生素飲料中的維生素B12[J]。浙江農業科學,2013,000(007):863-865
4。 林耀文,佘之蘊,李姣,蘇妙儀,範安妮,張施敬,王力清。微生物法測定含乳飲料中維生素B12含量[J]。飲料工業,2013,016(004):39-42
5。 陳緒華, 劉健, 江一飛。 不同測定培養基對維生素B12線性的影響[J]。 生物技術世界, 2013(04):53+131
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生產商HiMedia Laboratories是全球著名的微生物培養基供應商,
生產工藝均透過WHO-GMP、ISO9001、ISO13485認證,
【維生素B12測定培養基】在CE和FDA具有註冊登記。
產品資訊
中文:維生素B12測定用培養基
英文:Vitamin B12 Assay Medium
品牌:HiMedia®
規格:100G/瓶
貨號:M036
儲存溫度:8℃下密閉儲存,理想是放置於乾燥器中。
質控
該產品出廠前經廠家嚴格檢測,確保合格後方予放行。具體質控包括:
外觀(粉末顏色、均一度、是否結塊)
溶水後的培養基顏色和透明度
pH值(8。5% 水溶液,25℃)
培養反應(對萊士曼乳酸桿菌ATCC 7830 在35-37℃培養18-24小時)
生長試驗(用美國藥典維生素B12標準品,每管分別加入0。0,0。025,0。050,0。075,0。1,0。125,0。150和0。2ng,觀察菌株的連續生長狀況,在620nm測定吸光度)
(注:分別為對照,空白,標準品1,標準品3,標準品5)
優勢
該產品不含痕量維生素B12,有效避免標準曲線偏移和本底過高,結果準確可靠。